摘 要
犊牛腹泻是影响畜牧业生产效率和犊牛健康的重要疾病之一，而大肠杆菌作为其主要致病菌之一，其耐药性问题日益受到关注。本研究旨在调查犊牛腹泻病例中分离的大肠杆菌菌株的耐药谱及其分子机制，为临床合理用药提供科学依据。研究选取了某地区200头腹泻犊牛的粪便样本，通过细菌分离培养、生化鉴定及16S rRNA基因序列分析，共获得158株大肠杆菌菌株。采用 Kirby-Bauer 纸片扩散法对这些菌株进行了针对15种常用抗生素的药物敏感性测试，并利用聚合酶链式反应（PCR）技术检测了与耐药相关的常见基因。结果显示，分离菌株对四环素、磺胺类和氨苄西林表现出较高的耐药率，分别为78.5%、64.6%和59.5%，而对头孢曲松和庆大霉素的耐药率相对较低。进一步的分子机制研究表明，tet(A)、sul1和blaTEM等耐药基因在分离株中广泛存在，且部分菌株携带多重耐药基因。此外，本研究首次发现了一例携带新型耐药基因mcr-9的大肠杆菌菌株，表明该地区可能存在多重耐药基因水平转移的风险。综上所述，犊牛腹泻病例中分离的大肠杆菌普遍存在多重耐药现象，提示应加强对畜牧场抗生素使用的监管，并建立耐药性监测体系以保障动物健康和公共卫生安全。本研究不仅揭示了特定区域大肠杆菌耐药性的现状，还为后续深入探讨耐药基因传播机制提供了重要参考数据。关键词：犊牛腹泻；大肠杆菌耐药性；多重耐药基因；tet(A); mcr-9
目 录
摘 要 I
1 绪论 1
1.1 犊牛腹泻与大肠杆菌耐药性研究背景 1
1.2 犊牛腹泻中大肠杆菌耐药性研究意义 1
1.3 国内外大肠杆菌耐药性研究现状 1
1.4 本文研究方法与技术路线 2
2 犊牛腹泻病例中大肠杆菌分离与鉴定 3
2.1 样本采集与处理方法 3
2.2 大肠杆菌分离与纯化技术 3
2.3 大肠杆菌分子生物学鉴定方法 4
2.4 鉴定结果分析与数据统计 4
2.5 分离菌株的保存与后续应用 5
3 大肠杆菌耐药性检测与机制分析 6
3.1 耐药性检测方法与标准制定 6
3.2 常见抗生素对大肠杆菌的作用效果 6
3.3 耐药基因筛查与分子机制探讨 7
3.4 耐药性形成的影响因素分析 7
3.5 耐药性检测结果的综合评价 8
4 犊牛腹泻防控与耐药性管理策略 9
4.1 犊牛腹泻的综合防控措施 9
4.2 合理使用抗生素的建议与方案 9
4.3 替代抗生素的潜在方法与技术 10
4.4 耐药性监测体系的构建与完善 10
4.5 未来研究方向与展望 11
结 论 12
参 考 文 献 13
致 谢 14
